Cuantificar las proteínas en orina.
Fundamento teórico:
La adición de ácido sulfosalicílico a una solución de proteinas actúa sobre estas, dando lugar a la aparición de un fino precipitado en suspensión. Este precipitado se observa como una turbidez blanquecina cuya intensidad puede ser cuantificada por turbidimetría.
En la mayoría de los casos el examen de orina se realiza cuando se sospecha que tiene una enfermedad renal ( la albúmina es el primer indicio de un problema en los riñones) que las tiras reactivas no son capacer de detectar.
Es normal pequeñas cantidades de proteínas en la orina.
Materiales y Reactivos:
Tubos de ensayo
Micropipetas
Cubetas
Suero salino fisiológico (0.9g/dl )
Ácido sulfosalicilico al 3%
Agua destilada
Proteínas (7 g/dl)
Albúmina bovina
Procedimiento:
1- Rotular los tubos.
2-Preparar las siguientes disoluciones:
D1 ----> 1/50 (0.2 ml de patrón + 9.8 ml de SSF)------> 140 mg/dl
D2 -----> 1/100 (0.1 ml de patrón + 9.9 ml de SSF) ------>70 mg/dl
D3------->1/200 (0.05 ml de patrón + 9.95 ml de SSF)----->35 mg/dl
D4 ------> 1/400 (0.025 ml de patrón +9.975 ml de SSF)-----> 17.5 mg/dl
3- Preparación de las siguientes disoluciones:
4-Transferir a las cubetas.
5-Seleccionamos la longitud de onda a 660 nm.
6- Ajustar a cero el fotómetro con el BR.
7-Medir la absorbancia de P1, P2,P3 Y P4.
8-Medir la absorbancia del PB.
Resultados:
Absorbancia Concentración (mg/dl)
Patrón 1 0.904 28
Patrón 2 0.268 14
Patrón 3 0.16 7
Patrón 4 0.045 3.5
Absorbancia del tubo problema 0.76
Concentación=0.76/0.0315= 24.12 mg/dl
Observaciones:
El valor del patrón 2 no lo puse en la gráfica porque se salía del rango.
Conclusiones:
Como conclusión podemos destacar la importancia de una correcta determinación de proteínas en la orina para detectar enfermedades renales. Los valores de orina normal es menor de 20 mg/dl pero como en la orina añadimos proteínas en este caso no debemos de preocuparnos.
No hay comentarios:
Publicar un comentario