Determinación de glucosa en suero ( glucosa oxidasa) / orina.

Objetivo:

Determinación de la glucosa.

Fundamento teórico:

La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidación de glucosa a ácido glucónico. El peróxido de hidrógeno, producido se detecta mediante un aceptor cromógenico de oxígeno, fenol-ampirona en presencia de peroxidasa.

La intensidad del color depende de la concentración de glucosa presente en la muestra.

Valores de referencia en suero (60-110) mg/dl.

Valores de referencia en orina (0-15)mg/dl.

Materiales y Reactivos:

-Reactivo 1 (formado por TRIS pH 7.4 y Fenol).

-Reactivo 2 (Glucosa oxidasa, Peroxidasa y 4- aminofenazona).

-Muestra de orina y de suero.

-Cubeta.

-Espectrofotómetro.

-Tubos de ensayo.

-Gradilla.

-Micropipeta.

-Puntas para la micropipeta.
 
Procedimiento:

-Preparación de reactivos ( disolver el contenido del reactivo 2 en el reactivo 1).
 

-Coger tres tubos de ensayo, donde preparamos el blanco, la muestra y el patrón.

-El blanco se prepara añadiendo 1 ml de reactivo de trabajo.

-El patrón se prepara añadiendo 1 ml de reactivo de trabajo y 10 μl de patrón.

-La muestra se prepara añadiendo 1 ml de reactivo de trabajo y 10 μl de muestra.
 

-Depositar  cada disolución en una cubeta ( tenemos una cubeta con blanco, muestra y patrón).
 

-Llevamos las cubetas al espectrofotómetro con una longitud de onda a 505 nm.

-Anotar los resultados .

-Repetir el proceso con la muestra de suero.


Resultados:

Orina.

Muestra: 0.021

Patrón: 0.014

0.021/0.014*100=150 mg/dl


Suero

Muestra: 0.319

Patrón: 0.402

0.319/0.402*100=79.35 mg/dl


Conclusiones:

La glucosa en suero tiene una valor de 79.35 mg/dl dentro de los valores de referencia.

La orina tiene una valor de 150mg/dl dentro de los valores de referencia.